Дзякуй за наведванне Nature.com.Вы выкарыстоўваеце версію браўзера з абмежаванай падтрымкай CSS.Для найлепшага вопыту мы рэкамендуем вам выкарыстоўваць абноўлены браўзер (або адключыць рэжым сумяшчальнасці ў Internet Explorer).Акрамя таго, каб забяспечыць пастаянную падтрымку, мы паказваем сайт без стыляў і JavaScript.
Адлюстроўвае карусель з трох слайдаў адначасова.Выкарыстоўвайце кнопкі «Папярэдні» і «Наступны», каб перамяшчацца па трох слайдах адначасова, або выкарыстоўвайце кнопкі паўзунка ў канцы, каб перамяшчацца па трох слайдах адначасова.
Быў распрацаваны звышкампактны (54 × 58 × 8,5 мм) і шырокаапертурны (1 × 7 мм) дзевяцікаляровы спектрометр, «падзелены на дзве часткі» наборам з дзесяці дыхроічных люстэркаў, які выкарыстоўваўся для імгненнай спектральнай візуалізацыі.Падаючы светлавы паток з папярочным сячэннем, меншым за памер дыяфрагмы, дзеліцца на суцэльную паласу шырынёй 20 нм і дзевяць каляровых патокаў з цэнтральнымі даўжынямі хваль 530, 550, 570, 590, 610, 630, 650, 670 і 690 нм.Выявы дзевяці каляровых патокаў адначасова эфектыўна вымяраюцца датчыкам выявы.У адрозненне ад звычайных матрыц дыхроічных люстэркаў, распрацаваная матрыца дыхроічных люстэркаў мае ўнікальную канфігурацыю з двух частак, якая не толькі павялічвае колькасць колераў, якія можна вымяраць адначасова, але і паляпшае раздзяляльнасць выявы для кожнага каляровага патоку.Распрацаваны девятицветный спектрометр выкарыстоўваецца для чатырохкапілярнага электрафарэзу.Адначасовы колькасны аналіз васьмі фарбавальнікаў, якія адначасова мігруюць у кожным капіляры, з выкарыстаннем дзевяцікаляровай флуарэсцэнцыі, выкліканай лазерам.Паколькі дзевяцікаляровы спектрометр не толькі звышмалы і недарагі, але таксама мае высокі светлавы паток і дастатковую спектральную раздзяляльнасць для большасці спектральных відарысаў, яго можна шырока выкарыстоўваць у розных галінах.
Гіперспектральная і шматспектральная візуалізацыя стала важнай часткай астраноміі2, дыстанцыйнага зандзіравання для назірання Зямлі3,4, кантролю якасці ежы і вады5,6, захавання мастацтва і археалогіі7, крыміналістыкі8, хірургіі9, біямедыцынскага аналізу і дыягностыкі10,11 і г.д. Поле 1 Незаменная тэхналогія ,12,13.Метады вымярэння спектру святла, выпраменьванага кожнай кропкай выпраменьвання ў поле зроку, падзяляюцца на (1) кропкавае сканіраванне («венік») 14,15, (2) лінейнае сканаванне («мяцёлка») 16,17,18 , (3) хвалі сканавання даўжыні19,20,21 і (4) выявы22,23,24,25.У выпадку ўсіх гэтых метадаў прасторавае раздзяленне, спектральнае раздзяленне і часовае раздзяленне маюць кампрамісныя адносіны9,10,12,26.Акрамя таго, святлоаддача аказвае значны ўплыў на адчувальнасць, г.зн. на стаўленне сігнал/шум у спектральных малюнках26.Светлавы паток, гэта значыць эфектыўнасць выкарыстання святла, прама прапарцыянальны адносінам фактычна вымеранай колькасці святла кожнай светлавой кропкі ў адзінку часу да агульнай колькасці святла вымеранага дыяпазону даўжынь хваль.Катэгорыя (4) з'яўляецца прыдатным метадам, калі інтэнсіўнасць або спектр святла, выпраменьванага кожнай кропкай выпраменьвання, змяняецца з часам або калі становішча кожнай кропкі выпраменьвання змяняецца з часам, таму што спектр святла, выпраменьванага ўсімі кропкамі выпраменьвання, вымяраецца адначасова.24.
Большасць вышэйпералічаных метадаў спалучаецца з вялікімі, складанымі і/або дарагімі спектрометрамі з выкарыстаннем 18 рашотак або 14, 16, 22, 23 прызм для класаў (1), (2) і (4) або 20, 21 фільтруючых дыскаў, вадкасных фільтраў .Крышталічныя наладжвальныя фільтры (LCTF)25 або акустааптычныя наладжвальныя фільтры (AOTF)19 катэгорыі (3).Наадварот, шматлюстраныя спектрометры катэгорыі (4) невялікія і недарагія з-за іх простай канфігурацыі27,28,29,30.Акрамя таго, яны маюць высокі светлавы паток, таму што святло, сумеснае для кожнага дыхроічнага люстэрка (гэта значыць святло, якое праходзіць і адбіваецца ад падаючага святла на кожнае дыхроічнае люстэрка), выкарыстоўваецца поўнасцю і пастаянна.Аднак колькасць дыяпазонаў даўжынь хваль (г.зн. колераў), якія неабходна вымяраць адначасова, абмежавана прыкладна чатырма.
Спектральная візуалізацыя на аснове флуарэсцэнтнага выяўлення звычайна выкарыстоўваецца для мультыплекснага аналізу ў біямедыцынскай дэтэкцыі і дыягностыцы 10, 13.Пры мультыплексаванні, паколькі некалькі аналітаў (напрыклад, спецыфічная ДНК або вавёркі) пазначаюцца рознымі флуоресцентными фарбавальнікамі, кожны аналіт, які прысутнічае ў кожнай кропцы выпраменьвання ў поле зроку, вызначаецца колькасна з дапамогай шматкампанентнага аналізу.32 разбівае выяўлены спектр флуарэсцэнцыі, выпраменьванай кожнай кропкай выпраменьвання.Падчас гэтага працэсу розныя фарбавальнікі, кожны з якіх выпраменьвае розную флуарэсцэнцыю, могуць лакалізавацца, гэта значыць суіснаваць у прасторы і часе.У цяперашні час максімальная колькасць фарбавальнікаў, якія можна ўзбуджаць адным лазерным прамянём, складае восем33.Гэтая верхняя мяжа вызначаецца не спектральным разрозненнем (г.зн. колькасцю колераў), а шырынёй спектру флуарэсцэнцыі (≥50 нм) і велічынёй стоксавага зруху фарбавальніка (≤200 нм) пры FRET (з выкарыстаннем FRET)10. .Аднак колькасць колераў павінна быць большай або роўнай колькасці фарбавальнікаў, каб выключыць спектральнае перакрыцце змешаных фарбавальнікаў31,32.Такім чынам, неабходна павялічыць колькасць адначасова вымяраных колераў да васьмі і больш.
Нядаўна быў распрацаваны звышкампактны гептахроічны спектрометр (з выкарыстаннем масіва гептыхроічных люстэркаў і датчыка выявы для вымярэння чатырох флуарэсцэнтных патокаў).Спектрометр на два-тры парадку меншы за звычайныя спектрометры з рашоткамі або прызмамі34,35.Тым не менш, цяжка змясціць больш за сем дикротических люстэркаў у спектрометр і адначасова вымяраць больш за сем колераў36,37.З павелічэннем колькасці дикротических люстэркаў максімальная розніца ў даўжынях аптычных шляхоў дикротических светлавых патокаў павялічваецца, і ўскладняецца адлюстраванне ўсіх светлавых патокаў на адной сэнсарнай плоскасці.Найбольшая даўжыня аптычнага шляху светлавога патоку таксама павялічваецца, таму шырыня апертуры спектрометра (г.зн. максімальная шырыня святла, аналізаванага спектрометрам) памяншаецца.
У адказ на вышэйзгаданыя праблемы быў распрацаваны звышкампактны дзевяцікаляровы спектрометр з двухслаёвай «дыхроічным» дэхраматычным люстэркам і датчыкам выявы для імгненнага атрымання спектральных малюнкаў [катэгорыя (4)].У параўнанні з папярэднімі спектрометрамі распрацаваны спектрометр мае меншую розніцу ў максімальнай даўжыні аптычнага шляху і меншую максімальную даўжыню аптычнага шляху.Ён быў ужыты для электрафарэзу з чатырма капілярамі для выяўлення індукаванай лазерам дзевяцікаляровай флуарэсцэнцыі і колькаснай ацэнкі адначасовай міграцыі васьмі фарбавальнікаў у кожным капіляры.Паколькі распрацаваны спектрометр не толькі звышмалы і недарагі, але таксама мае высокі светлавы паток і дастатковую спектральную раздзяляльнасць для большасці прымянення спектральных малюнкаў, ён можа быць шырока выкарыстаны ў розных галінах.
Традыцыйны дзевяцікаляровы спектрометр паказаны на мал.1а.Яго канструкцыя падобная на папярэдні звышмалы сямікаляровы спектрометр 31. Ён складаецца з дзевяці дыхроічных люстэркаў, размешчаных гарызантальна пад вуглом 45° направа, а датчык выявы (S) размешчаны над дзевяццю дыхроічнымі люстэркамі.Святло, якое паступае знізу (C0), дзеліцца групай з дзевяці дыхроічных люстэркаў на дзевяць светлавых патокаў, якія ідуць уверх (C1, C2, C3, C4, C5, C6, C7, C8 і C9).Усе дзевяць каляровых патокаў падаюцца непасрэдна на датчык выявы і выяўляюцца адначасова.У гэтым даследаванні C1, C2, C3, C4, C5, C6, C7, C8 і C9 размешчаны ў парадку даўжыні хвалі і прадстаўлены пурпурным, фіялетавым, сінім, блакітным, зялёным, жоўтым, аранжавым, чырвона-аранжавым і чырвоны, адпаведна.Хоць гэтыя абазначэнні колераў выкарыстоўваюцца ў гэтым дакуменце, як паказана на малюнку 3, таму што яны адрозніваюцца ад фактычных колераў, якія бачыць чалавечае вока.
Прынцыповыя схемы звычайных і новых дзевяцікаляровых спектрометраў.(а) Звычайны дзевяцікаляровы спектрометр з наборам з дзевяці дыхроічных люстэркаў.(b) Новы дзевяцікаляровы спектрометр з двухслаёвым дыхроічным люстэркам.Падаючы светлавы паток C0 дзеліцца на дзевяць каляровых светлавых патокаў C1-C9 і выяўляецца датчыкам выявы S.
Распрацаваны новы дзевяцікаляровы спектрометр мае двухслаёвую дыхроічную люстраную рашотку і датчык выявы, як паказана на мал. 1b.У ніжнім ярусе пяць дыхроічных люстэркаў нахілены на 45° управа, выраўнаваныя ўправа ад цэнтра масіва дэкамераў.На верхнім узроўні пяць дадатковых дыхроічных люстэркаў нахілены на 45° налева і размешчаны ад цэнтра налева.Самае левае дикротичное люстэрка ніжняга пласта і крайняе правае дикротичное люстэрка верхняга пласта перакрываюць адзін аднаго.Падаючы светлавы паток (C0) дзеліцца знізу на чатыры выходныя храматычныя патокі (C1-C4) пяццю дыхроічнымі люстэркамі справа і пяць выходных храматычных патокаў (C5-C4) пяццю дыхроічнымі люстэркамі злева C9).Як і ў звычайных дзевяцікаляровых спектрометрах, усе дзевяць каляровых патокаў непасрэдна ўводзяцца ў датчык выявы (S) і выяўляюцца адначасова.Параўноўваючы малюнкі 1а і 1б, можна ўбачыць, што ў выпадку новага дзевяцікаляровага спектрометра максімальная розніца і самая доўгая даўжыня аптычнага шляху дзевяці каляровых патокаў памяншаюцца ўдвая.
Падрабязная канструкцыя звышмалой двухслаёвай матрыцы дыхроічных люстэркаў 29 мм (шырыня) × 31 мм (глыбіня) × 6 мм (вышыня) паказана на малюнку 2. Матыца дзесятковых дыхроічных люстэркаў складаецца з пяці дыхроічных люстэркаў справа (M1-M5) і пяць дикротических люстэркаў злева (M6-M9 і яшчэ адно M5), кожнае дикротичное люстэрка замацавана ў верхнім алюмініевым кранштэйне.Усе дикротические люстэрка размешчаны ў шахматным парадку, каб кампенсаваць паралельнае зрушэнне з-за праламлення патоку праз люстэрка.Ніжэй M1 замацаваны паласавы фільтр (BP).Памеры M1 і BP складаюць 10 мм (доўгі бок) х 1,9 мм (кароткі бок) х 0,5 мм (таўшчыня).Памеры астатніх дикротических люстэркаў складаюць 15 мм × 1,9 мм × 0,5 мм.Крок матрыцы паміж M1 і M2 складае 1,7 мм, у той час як крок матрыцы іншых дыхроічных люстэркаў складае 1,6 мм.На мал.2c аб'ядноўвае падаючы светлавы паток C0 і дзевяць каляровых светлавых патокаў C1-C9, падзеленых дэкамернай матрыцай люстэркаў.
Пабудова двухслаёвай матрыцы дыкротычнага люстэрка.(А) Перспектыўны выгляд і (Б) выгляд папярочнага разрэзу двухслаёвага дыкротычнага люстэрка (памеры 29 мм х 31 мм х 6 мм).Ён складаецца з пяці дыхроічных люстэркаў (M1-M5), размешчаных у ніжнім пласце, пяці дикротических люстэркаў (M6-M9 і яшчэ M5), размешчаных у верхнім пласце, і паласавога фільтра (BP), размешчанага ніжэй M1.(С) Выгляд папярочнага разрэзу ў вертыкальным кірунку з перакрыццем C0 і C1-C9.
Шырыня праёму ў гарызантальным напрамку, пазначаная шырынёй С0 на рыс. 2, в, роўная 1 мм, а ў напрамку, перпендыкулярным плоскасці рыс. 2, в, зададзеная канструкцыяй алюмініевага кранштэйна, – 7 мм.Гэта значыць новы девятицветный спектрометр мае вялікі памер апертуры 1 мм × 7 мм.Аптычны шлях C4 з'яўляецца самым доўгім сярод C1-C9, а аптычны шлях C4 унутры дыхроічнага люстэрка з-за звышмалых памераў (29 мм × 31 мм × 6 мм) складае 12 мм.У той жа час даўжыня аптычнага шляху C5 з'яўляецца самай кароткай сярод C1-C9, а даўжыня аптычнага шляху C5 складае 5,7 мм.Такім чынам, максімальная розніца ў даўжыні аптычнага шляху складае 6,3 мм.Прыведзеныя вышэй даўжыні аптычнага шляху скарэкціраваны на даўжыню аптычнага шляху для аптычнай перадачы M1-M9 і BP (з кварца).
Спектральныя ўласцівасці М1−М9 і ВР разлічаны такім чынам, каб патокі С1, С2, С3, С4, С5, С6, С7, С8 і С9 знаходзіліся ў дыяпазоне даўжынь хваль 520–540, 540–560, 560–580, 580. –600, 600–620, 620–640, 640–660, 660–680 і 680–700 нм адпаведна.
Фатаграфія вырабленай матрыцы дэхраматычных люстэркаў прадстаўлена на мал. 3а.М1-М9 і БП прыляпляюцца адпаведна да схілу 45 градусаў і гарызантальнай плоскасці алюмініевай апоры, а М1 і БП хаваюцца на адваротным баку фігуры.
Выраб масіва дэканавых люстэркаў і яго дэманстрацыя.(а) Масіў вырабленых дэкахраматычных люстэркаў.(b) Дзевяцікаляровы малюнак памерам 1 × 7 мм, праецыраваны на ліст паперы, размешчаны перад наборам дэхраматычных люстэркаў і асветлены белым святлом.(c) Масіў дэкахраматычных люстэркаў, асветленых ззаду белым святлом.(d) Паток дзевяці колераў, які вылучаецца з люстранога шэрагу дэканаў, назіраецца шляхам размяшчэння запоўненай дымам акрылавай каністры перад люстраным шэрагам дэканаў у кропцы c і зацямнення пакоя.
Вымераныя спектры прапускання M1-M9 C0 пры куце падзення 45 ° і вымераны спектр прапускання BP C0 пры куце падзення 0 ° паказаны на мал.4а.Спектры прапускання C1-C9 адносна C0 паказаны на мал.4б.Гэтыя спектры былі разлічаны па спектрах на мал.4а ў адпаведнасці з аптычным шляхам С1-С9 на мал. 4а.1б і 2в.Напрыклад, TS(C4) = TS (BP) × [1 − TS (M1)] × TS (M2) × TS (M3) × TS (M4) × [1 − TS (M5)], TS(C9 ) = TS (BP) × TS (M1) × [1 − TS (M6)] × TS (M7) × TS (M8) × TS (M9) × [1 − TS (M5)], дзе TS(X) і [ 1 − TS(X)] — спектры прапускання і адлюстравання X адпаведна.Як паказана на малюнку 4b, прапускная здольнасць (прапускная здольнасць ≥50%) C1, C2, C3, C4, C5, C6, C7, C8 і C9 складае 521-540, 541-562, 563-580, 581-602, 603 -623, 624-641, 642-657, 659-680 і 682-699 нм.Гэтыя вынікі адпавядаюць распрацаваным дыяпазонам.Акрамя таго, эфектыўнасць выкарыстання святла C0 высокая, гэта значыць сярэдняе максімальнае святлопрапусканне C1-C9 складае 92%.
Спектры прапускання дыхроічнага люстэрка і расшчэпленага дзевяцікаляровага патоку.(А) Вымераныя спектры прапускання M1-M9 пры падзенні 45 ° і ВР пры падзенні 0 °.(Б) Спектры прапускання C1-C9 адносна C0, разлічаныя па (а).
На мал.3c, масіў дихроичных люстэркаў размешчаны вертыкальна, так што яго правы бок на мал. 3a з'яўляецца верхнім бокам, а белы прамень калімаванага святлодыёда (C0) асвятляецца ззаду.Масіў дэкахраматычных люстэркаў, паказаны на малюнку 3a, усталяваны ў адаптары памерам 54 мм (вышыня) × 58 мм (глыбіня) × 8,5 мм (таўшчыня).На мал.3d, у дадатак да стану, паказанага на мал.3c, напоўнены дымам акрылавы бак быў размешчаны перад наборам дэкахраматычных люстэркаў, а святло ў пакоі было выключана.У выніку ў рэзервуары бачныя дзевяць дыхроічных патокаў, якія ідуць ад масіва дэкатроічных люстэркаў.Кожны разбіты струмень мае прастакутнае перасек з памерамі 1 × 7 мм, што адпавядае памеру апертуры новага девятицветного спектрометра.На малюнку 3b аркуш паперы размешчаны перад наборам дыхроічных люстэркаў на малюнку 3c, і з напрамку руху паперы назіраецца выява дзевяці дыхроічных патокаў памерам 1 х 7 мм, праецыраваных на паперу.патокі.Дзевяць патокаў колерападзелу на мал.3b і d - гэта C4, C3, C2, C1, C5, C6, C7, C8 і C9 зверху ўніз, якія таксама можна ўбачыць на малюнках 1 і 2. 1b і 2c.Яны назіраюцца ў колерах, адпаведных іх даўжыням хваль.З-за нізкай інтэнсіўнасці белага святла святлодыёда (гл. дадатковы малюнак S3) і адчувальнасці каляровай камеры, якая выкарыстоўваецца для здымкі C9 (682–699 нм) на мал. Іншыя патокі расшчаплення слабыя.Сапраўды гэтак жа C9 быў слаба бачны няўзброеным вокам.Тым часам C2 (другі паток зверху) выглядае зялёным на малюнку 3, але няўзброеным вокам выглядае больш жоўтым.
Пераход ад малюнка 3c да d паказаны ў дадатковым відэа 1. Адразу пасля таго, як белае святло ад святлодыёда праходзіць праз дэхраматычнае люстэрка, яно раздзяляецца адначасова на дзевяць каляровых патокаў.У рэшце рэшт, дым у чане паступова рассейваўся зверху ўніз, так што дзевяць каляровых парашкоў таксама зніклі зверху ўніз.Наадварот, у дадатковым відэа 2, калі даўжыня хвалі светлавога патоку, які падае на масіў дэхраматычных люстэркаў, была зменена з доўгай на кароткую ў парадку 690, 671, 650, 632, 610, 589, 568, 550 і 532 нм ., Адлюстроўваюцца толькі адпаведныя падзеленыя патокі з дзевяці падзеленых патокаў у парадку C9, C8, C7, C6, C5, C4, C3, C2 і C1.Акрылавы рэзервуар заменены кварцавым басейнам, і шматкі кожнага шунтаванага патоку можна выразна назіраць з нахілу ўверх.Акрамя таго, суб-відэа 3 рэдагуецца такім чынам, што частка са зменай даўжыні хвалі суб-відэа 2 прайграваецца паўторна.Гэта найбольш красамоўнае выражэнне характарыстык дэкахраматычнага шэрагу люстэркаў.
Вышэйпрыведзеныя вынікі паказваюць, што вырабленая дэхраматычная люстэрка або новы дзевяцікаляровы спектрометр працуе, як задумана.Новы дзевяцікаляровы спектрометр утвараецца шляхам мантажу масіва дэхраматычных люстэркаў з адаптарамі непасрэдна на плату датчыка выявы.
Светлавы паток з дыяпазонам даўжынь хваль ад 400 да 750 нм, выпраменьваны чатырма кропкамі выпраменьвання φ50 мкм, размешчанымі з інтэрвалам 1 мм у напрамку, перпендыкулярным да плоскасці мал. 2c, адпаведна Даследаванні 31, 34. Масіў з чатырох лінзаў складаецца з чатыры лінзы φ1 мм з фокуснай адлегласцю 1,4 мм і крокам 1 мм.Чатыры калімаваных патоку (чатыры C0) падаюць на DP новага дзевяцікаляровага спектрометра з інтэрвалам у 1 мм.Масіў дыхроічных люстэркаў дзеліць кожны паток (C0) на дзевяць каляровых патокаў (C1-C9).Затым атрыманыя 36 патокаў (чатыры наборы C1-C9) уводзяцца непасрэдна ў датчык выявы CMOS (S), непасрэдна падлучаны да масіва дыхроічных люстэркаў.У выніку, як паказана на мал. 5а, з-за малой максімальнай рознасці аптычнага шляху і кароткага максімальнага аптычнага шляху выявы ўсіх 36 патокаў былі выяўлены адначасова і выразна з аднолькавым памерам.Згодна са спектрамі ўніз па плыні (гл. дадатковы малюнак S4), інтэнсіўнасць выявы чатырох груп C1, C2 і C3 адносна нізкая.Трыццаць шэсць малюнкаў мелі памер 0,57 ± 0,05 мм (сярэдняе ± SD).Такім чынам, павелічэнне выявы ў сярэднім склала 11,4.Вертыкальны інтэрвал паміж выявамі складае ў сярэднім 1 мм (такі ж інтэрвал, што і ў лінзаў), а гарызантальны - 1,6 мм (такі ж, як у дыхроічных люстэркаў).Паколькі памер выявы значна меншы за адлегласць паміж выявамі, кожная выява можа быць вымерана незалежна (з нізкім узроўнем перакрыжаваных перашкод).Між тым выявы дваццаці васьмі патокаў, запісаныя звычайным сямікаляровым спектрометрам, які выкарыстоўваўся ў нашым папярэднім даследаванні, паказаны на мал. 5 B. Масіў з сямі дыхроічных люстэркаў быў створаны шляхам выдалення двух крайніх правых дыхроічных люстэркаў з масіва з дзевяці дыхроічных люстэркі на малюнку 1а.Не ўсе выявы рэзкія, памер выявы павялічваецца ад C1 да C7.Дваццаць восем малюнкаў маюць памеры 0,70 ± 0,19 мм.Такім чынам, цяжка падтрымліваць высокую раздзяляльнасць выявы на ўсіх малюнках.Каэфіцыент варыяцыі (CV) для выявы памеру 28 на малюнку 5b склаў 28%, у той час як CV для выявы памеру 36 на малюнку 5a знізіўся да 9%.Прыведзеныя вышэй вынікі паказваюць, што новы дзевяцікаляровы спектрометр не толькі павялічвае колькасць адначасова вымераных колераў з сямі да дзевяці, але таксама мае высокае раздзяленне выявы для кожнага колеру.
Параўнанне якасці расшчэпленага малюнка, сфармаванага звычайным і новым спектрометрамі.(a) Чатыры групы дзевяцікаляровых малюнкаў (C1-C9), створаных новым дзевяцікаляровым спектрометрам.(b) Чатыры наборы сямікаляровых падзеленых малюнкаў (C1-C7), сфарміраваных з дапамогай звычайнага сямікаляровага спектрометра.Патокі (C0) з даўжынямі хваль ад 400 да 750 нм з чатырох кропак выпраменьвання калімуюць і падаюць на кожны спектрометр адпаведна.
Спектральныя характарыстыкі дзевяцікаляровага спектрометра былі ацэнены эксперыментальна, і вынікі ацэнкі паказаны на малюнку 6. Звярніце ўвагу, што на малюнку 6а паказаны тыя ж вынікі, што і на малюнку 5а, гэта значыць на даўжынях хваль 4 C0 400–750 нм выяўляюцца ўсе 36 малюнкаў. (4 групы С1–С9).Наадварот, як паказана на мал. 6b–j, калі кожны C0 мае пэўную даўжыню хвалі 530, 550, 570, 590, 610, 630, 650, 670 або 690 нм, ёсць амаль толькі чатыры адпаведныя выявы (чатыры групы, выяўленыя C1, C2, C3, C4, C5, C6, C7, C8 або C9).Аднак некаторыя з малюнкаў, якія знаходзяцца побач з чатырма адпаведнымі малюнкамі, выяўляюцца вельмі слаба, таму што спектры прапускання C1–C9, паказаныя на мал. 4b, нязначна перакрываюцца, і кожны C0 мае паласу 10 нм на пэўнай даўжыні хвалі, як апісана ў метадзе.Гэтыя вынікі адпавядаюць спектрам прапускання C1-C9, паказаным на мал.4b і дадатковыя відэа 2 і 3. Іншымі словамі, дзевяцікаляровы спектрометр працуе належным чынам на аснове вынікаў, паказаных на мал.4б.Такім чынам, робіцца выснова, што размеркаванне інтэнсіўнасці выявы C1-C9 з'яўляецца спектрам кожнага C0.
Спектральныя характарыстыкі дзевяцікаляровага спектрометра.Новы дзевяцікаляровы спектрометр стварае чатыры наборы дзевяцікаляровых малюнкаў (C1-C9), калі падаючае святло (чатыры C0) мае даўжыню хвалі (а) 400-750 нм (як паказана на малюнку 5а), (б) 530 нм.нм, (c) 550 нм, (d) 570 нм, (e) 590 нм, (f) 610 нм, (g) 630 нм, (h) 650 нм, (i) 670 нм, (j) 690 нм, адпаведна.
Распрацаваны дзевяцікаляровы спектрометр выкарыстоўваўся для чатырохкапілярнага электрафарэзу (падрабязнасці гл. у дадатковых матэрыялах)31,34,35.Четырехкапиллярная матрыца складаецца з чатырох капіляраў (вонкавы дыяметр 360 мкм і ўнутраны дыяметр 50 мкм), размешчаных з інтэрвалам 1 мм у месцы лазернага апраменьвання.Узоры, якія змяшчаюць фрагменты ДНК, пазначаныя 8 фарбавальнікамі, а менавіта FL-6C (фарбавальнік 1), JOE-6C (фарбавальнік 2), dR6G (фарбавальнік 3), TMR-6C (фарбавальнік 4), CXR-6C (фарбавальнік 5), TOM- 6C (фарбавальнік 6), LIZ (фарбавальнік 7) і WEN (фарбавальнік 8) у парадку ўзрастання даўжыні флуоресцентной хвалі, падзеленыя ў кожным з чатырох капіляраў (далей Cap1, Cap2, Cap3 і Cap4).Выкліканая лазерам флуарэсцэнцыя Cap1-Cap4 калімавалася з дапамогай масіва з чатырох лінзаў і адначасова запісвалася з дапамогай дзевяцікаляровага спектрометра.Дынаміка інтэнсіўнасці девятицветной (С1-С9) флуарэсцэнцыі пры электрафарэзе, то ёсць девятицветной электрофореграммы кожнага капіляра, прадстаўлена на мал. 7а.Эквівалентная дзевяцікаляровая электрафарэграма атрымана ў Cap1-Cap4.Як паказана стрэлкамі Cap1 на малюнку 7a, восем пікаў на кожнай дзевяцікаляровай электрафарэграме паказваюць адно флуарэсцэнтнае выпраменьванне ад Dye1-Dye8 адпаведна.
Адначасовае колькаснае вызначэнне васьмі фарбавальнікаў з дапамогай дзевяцікаляровага чатырохкапілярнага электрафарэзнага спектрометра.(А) Дзевяцікаляровая (C1-C9) электрафарэграма кожнага капіляра.Восем пікаў, пазначаных стрэлкамі Cap1, паказваюць індывідуальныя флуарэсцэнтныя выпраменьванні васьмі фарбавальнікаў (Dye1-Dye8).Колеры стрэлак адпавядаюць колерам (b) і (c).(Б) Спектры флуарэсцэнцыі васьмі фарбавальнікаў (Dye1-Dye8) на капіляр.c Электрафераграмы васьмі фарбавальнікаў (Dye1-Dye8) на капіляр.Пікі фрагментаў ДНК, пазначаных Dye7, пазначаны стрэлкамі, а іх даўжыня асноў Cap4 пазначана.
Размеркаванне інтэнсіўнасці C1-C9 на васьмі піках паказана на мал.7б адпаведна.Паколькі C1-C9 і Dye1-Dye8 знаходзяцца ў парадку даўжынь хваль, восем размеркаванняў на мал. 7b паказваюць спектры флуарэсцэнцыі Dye1-Dye8 паслядоўна злева направа.У гэтым даследаванні Dye1, Dye2, Dye3, Dye4, Dye5, Dye6, Dye7 і Dye8 з'яўляюцца ў пурпурным, фіялетавым, сінім, блакітным, зялёным, жоўтым, аранжавым і чырвоным адпаведна.Звярніце ўвагу, што колеры стрэлак на мал. 7а адпавядаюць колерам фарбавальніка на мал. 7б.Інтэнсіўнасці флуарэсцэнцыі C1-C9 для кожнага спектру на малюнку 7b былі нармалізаваны такім чынам, што іх сума роўная адзінцы.Восем эквівалентных спектраў флуарэсцэнцыі былі атрыманы з Cap1-Cap4.Можна выразна назіраць спектральнае перакрыцце флуарэсцэнцыі паміж фарбавальнікам 1 і фарбавальнікам 8.
Як паказана на малюнку 7c, для кожнага капіляра дзевяцікаляровая электрафарэграма на малюнку 7a была пераўтворана ў электрафарэграму васьмі фарбавальнікаў шляхам шматкампанентнага аналізу на аснове васьмі спектраў флуарэсцэнцыі на малюнку 7b (падрабязнасці гл. у дадатковых матэрыялах).Паколькі спектральнае перакрыцце флуарэсцэнцыі на малюнку 7a не адлюстравана на малюнку 7c, Dye1-Dye8 можна ідэнтыфікаваць і колькасна вызначыць у кожны момант часу, нават калі розныя колькасці Dye1-Dye8 флуарэсцэнтуюць адначасова.Гэта немагчыма зрабіць з традыцыйным выяўленнем сямі колераў31, але можа быць дасягнута з дапамогай распрацаванага выяўлення дзевяці колераў.Як паказана стрэлкамі Cap1 на мал. 7c, толькі флуарэсцэнтныя сінглеты Dye3 (сіні), Dye8 (чырвоны), Dye5 (зялёны), Dye4 (блакітны), Dye2 (фіялетавы), Dye1 (пурпурны) і Dye6 (жоўты) ) выконваюцца ў чаканым храналагічным парадку.Для флуарэсцэнтнага выпраменьвання фарбавальніка 7 (аранжавы), у дадатак да аднаго піка, пазначанага аранжавай стрэлкай, назіралася некалькі іншых адзінкавых пікаў.Такі вынік звязаны з тым, што ўзоры ўтрымлівалі стандарты памераў, пазначаныя Dye7 фрагменты ДНК з рознай даўжынёй падставы.Як паказана на малюнку 7c, для Cap4 гэтыя даўжыні асноў складаюць 20, 40, 60, 80, 100, 114, 120, 140, 160, 180, 200, 214 і 220 даўжынь асноў.
Галоўнымі асаблівасцямі дзевяцікаляровага спектрометра, распрацаванага з выкарыстаннем матрыцы двухслаёвых дыкротычных люстэркаў, з'яўляюцца невялікія памеры і простая канструкцыя.Паколькі набор дэхраматычных люстэркаў у адаптары, паказаным на мал.3c, усталяваны непасрэдна на плаце датчыка выявы (гл. мал. S1 і S2), дзевяцікаляровы спектрометр мае тыя ж памеры, што і адаптар, г.зн. 54 × 58 × 8,5 мм.(таўшчыня) .Гэты звышмалы памер на два-тры парадку меншы, чым звычайныя спектрометры, якія выкарыстоўваюць рашоткі або прызмы.Акрамя таго, паколькі дзевяцікаляровы спектрометр сканфігураваны так, што святло трапляе на паверхню датчыка выявы перпендыкулярна, месца для дзевяцікаляровага спектрометра можна лёгка выдзеліць у такіх сістэмах, як мікраскопы, праточныя цытаметры або аналізатары.Аналізатар электрафарэзу з капілярнай рашоткай для яшчэ большай мініяцюрызацыі сістэмы.У той жа час памер дзесяці дикротических люстэркаў і палосавых фільтраў, якія выкарыстоўваюцца ў дзевяцікаляровым спектрометры, складае ўсяго 10×1,9×0,5 мм або 15×1,9×0,5 мм.Такім чынам, больш за 100 такіх маленькіх дыхроічных люстэркаў і паласавых фільтраў адпаведна можна выразаць з дыхроічнага люстэрка і паласавога фільтра 60 мм2 адпаведна.Такім чынам, шэраг дэхраматычных люстэркаў можна вырабіць па нізкай цане.
Яшчэ адна асаблівасць девятицветного спектрометра - выдатныя спектральныя характарыстыкі.У прыватнасці, гэта дазваляе атрымліваць спектральныя выявы здымкаў, гэта значыць адначасова атрымліваць выявы са спектральнай інфармацыяй.Для кожнага малюнка быў атрыманы бесперапынны спектр з дыяпазонам даўжынь хваль ад 520 да 700 нм і дазволам 20 нм.Іншымі словамі, дзевяць каляровых інтэнсіўнасцей святла вызначаюцца для кожнага малюнка, г.зн. дзевяць палос 20 нм, якія аднолькава падзяляюць дыяпазон даўжынь хваль ад 520 да 700 нм.Змяняючы спектральныя характарыстыкі дыхроічнага люстэрка і паласавога фільтра, можна рэгуляваць дыяпазон даўжынь хваль дзевяці палос і шырыню кожнай паласы.Выяўленне дзевяці колераў можа быць выкарыстана не толькі для вымярэння флуарэсцэнцыі з дапамогай спектральнай візуалізацыі (як апісана ў гэтым дакладзе), але і для многіх іншых распаўсюджаных прыкладанняў з выкарыстаннем спектральнай візуалізацыі.Нягледзячы на тое, што гіперспектральная візуалізацыя можа выяўляць сотні колераў, было выяўлена, што нават пры значным памяншэнні колькасці выяўляемых колераў некалькі аб'ектаў у полі зроку можна ідэнтыфікаваць з дастатковай дакладнасцю для многіх прыкладанняў38,39,40.Паколькі прасторавае раздзяленне, спектральнае раздзяленне і часовае раздзяленне маюць кампраміс у спектральным адлюстраванні, памяншэнне колькасці колераў можа палепшыць прасторавае і часовае раздзяленне.Ён таксама можа выкарыстоўваць простыя спектрометры, такія як распрацаваны ў гэтым даследаванні, і яшчэ больш паменшыць аб'ём вылічэнняў.
У гэтым даследаванні восем фарбавальнікаў былі колькасна вызначаны адначасова шляхам спектральнага падзелу іх перакрываючыхся спектраў флуарэсцэнцыі на аснове выяўлення дзевяці колераў.Адначасова можна колькасна вызначыць да дзевяці фарбавальнікаў, якія суіснуюць у часе і прасторы.Асаблівай перавагай девятицветного спектрометра з'яўляецца высокі светлавы паток і вялікая апертура (1 × 7 мм).Люстэрка дэкана мае максімальнае прапусканне 92% святла ад дыяфрагмы ў кожным з дзевяці дыяпазонаў даўжынь хваль.Эфектыўнасць выкарыстання падальнага святла ў дыяпазоне даўжынь хваль ад 520 да 700 нм складае практычна 100%.У такім шырокім дыяпазоне даўжынь хваль ніякая дыфракцыйная рашотка не можа забяспечыць такую высокую эфектыўнасць выкарыстання.Нават калі дыфракцыйная эфектыўнасць дыфракцыйнай рашоткі перавышае 90% на пэўнай даўжыні хвалі, па меры павелічэння розніцы паміж гэтай даўжынёй хвалі і пэўнай даўжынёй хвалі эфектыўнасць дыфракцыі на іншай даўжыні хвалі памяншаецца41.Шырыню дыяфрагмы, перпендыкулярную напрамку плоскасці на малюнку 2c, можна павялічыць з 7 мм да шырыні датчыка выявы, напрыклад, у выпадку датчыка выявы, які выкарыстоўваецца ў гэтым даследаванні, шляхам нязначнай змены масіва дэкамер.
Дзевяцікаляровы спектрометр можна выкарыстоўваць не толькі для капілярнага электрафарэзу, як паказана ў гэтым даследаванні, але і для розных іншых мэтаў.Напрыклад, як паказана на малюнку ніжэй, дзевяцікаляровы спектрометр можна прымяніць да флуарэсцэнтнага мікраскопа.Плоскасць ўзору адлюстроўваецца на датчыку выявы дзевяцікаляровага спектрометра праз 10-кратны аб'ектыў.Аптычная адлегласць паміж аб'ектывам і датчыкам выявы складае 200 мм, у той час як аптычная адлегласць паміж паверхняй падзення дзевяцікаляровага спектрометра і датчыкам выявы складае ўсяго 12 мм.Такім чынам, малюнак быў разрэзаны прыблізна да памеру адтуліны (1 × 7 мм) у плоскасці падзення і падзелены на дзевяць каляровых малюнкаў.Гэта значыць, спектральны малюнак дзевяцікаляровага здымка можа быць зроблены на ўчастку 0,1 × 0,7 мм у плоскасці ўзору.Акрамя таго, можна атрымаць дзевяцікаляровы спектральны малюнак большай плошчы на плоскасці ўзору, скануючы ўзор адносна аб'ектыва ў гарызантальным кірунку на мал. 2c.
Дэкахраматычныя кампаненты люстэрка, а менавіта M1-M9 і BP, былі выраблены на заказ кампаніяй Asahi Spectra Co., Ltd. з выкарыстаннем стандартных метадаў асаджэння.Шматслойныя дыэлектрычныя матэрыялы былі нанесены індывідуальна на дзесяць кварцавых пласцін памерам 60 × 60 мм і таўшчынёй 0,5 мм, якія адпавядаюць наступным патрабаванням: M1: IA = 45 °, R ≥ 90% пры 520–590 нм, Tave ≥ 90% пры 610– 610 нм.700 нм, M2: IA = 45°, R ≥ 90% пры 520–530 нм, Tave ≥ 90% пры 550–600 нм, M3: IA = 45°, R ≥ 90% пры 540–550 нм, Tave ≥ 90 % пры 570–600 нм, M4: IA = 45°, R ≥ 90% пры 560–570 нм, Tave ≥ 90% пры 590–600 нм, M5: IA = 45°, R ≥ 98% пры 580–600 нм , R ≥ 98% пры 680–700 нм, M6: IA = 45°, Tave ≥ 90% пры 600–610 нм, R ≥ 90% пры 630–700 нм, M7: IA = 45°, R ≥ 90% пры 620–630 нм, Taw ≥ 90% пры 650–700 нм, M8: IA = 45°, R ≥ 90% пры 640–650 нм, Taw ≥ 90% пры 670–700 нм, M9: IA = 45°, R ≥ 90% пры 650-670 нм, Tave ≥ 90% пры 690-700 нм, BP: IA = 0°, T ≤ 0,01% пры 505 нм, Tave ≥ 95% пры 530-690 нм пры 530 нм T ≥ 90% пры -690 нм і T ≤ 1 % пры 725-750 нм, дзе IA, T, Tave і R — вугал падзення, каэфіцыент прапускання, сярэдні каэфіцыент прапускання і каэфіцыент непалярызаванага адлюстравання святла.
Белае святло (C0) з дыяпазонам даўжынь хваль 400–750 нм, выпраменьванае святлодыёднай крыніцай святла (AS 3000, AS ONE CORPORATION), было калімавана і падала вертыкальна на DP масіва дыхроічных люстэркаў.Спектр белага святла святлодыёдаў паказаны на дадатковым малюнку S3.Размясціце акрылавы рэзервуар (памерамі 150 × 150 × 30 мм) непасрэдна перад люстэркам дэкамеры, насупраць БП.Затым дым, які ўтвараўся пры апусканні сухога лёду ў ваду, вылівалі ў акрылавы рэзервуар, каб назіраць за дзевяцікаляровымі патокамі C1-C9, якія зыходзяць ад масіва дэкахраматычных люстэркаў.
У якасці альтэрнатывы калімаваны белы святло (C0) прапускаецца праз фільтр перад уваходам у DP.Першапачаткова фільтры былі фільтрамі нейтральнай шчыльнасці з аптычнай шчыльнасцю 0,6.Затым выкарыстоўвайце матарызаваны фільтр (FW212C, FW212C, Thorlabs).Нарэшце, зноў уключыце фільтр ND.Прапускная здольнасць дзевяці паласавых фільтраў адпавядае C9, C8, C7, C6, C5, C4, C3, C2 і C1 адпаведна.Кварцавая клетка з унутранымі памерамі 40 (аптычная даўжыня) х 42,5 (вышыня) х 10 мм (шырыня) была размешчана перад наборам дэкахраматычных люстэркаў насупраць BP.Затым дым падаецца праз трубку ў кварцавую ячэйку для падтрымання канцэнтрацыі дыму ў кварцавай ячэйцы для візуалізацыі дзевяцікаляровых патокаў C1-C9, якія зыходзяць ад дэкахраматычнага люстэрка.
Відэа дзевяцікаляровага светлавога патоку, які зыходзіць ад масіва дэканавых люстэркаў, было знята ў рэжыме пакадравай здымкі на iPhone XS.Рабіце выявы сцэны з частатой 1 кадр у секунду і кампілюйце выявы для стварэння відэа з хуткасцю 30 кадраў у секунду (для дадатковых відэа 1) або 24 кадраў у секунду (для дадатковых відэа 2 і 3).
Змесціце пласціну з нержавеючай сталі таўшчынёй 50 мкм (з чатырма адтулінамі дыяметрам 50 мкм з інтэрвалам 1 мм) на дыфузійную пласціну.Святло з даўжынёй хвалі 400-750 нм выпраменьваецца на пласціну рассейвальніка, атрыманую шляхам прапускання святла галагенавай лямпы праз фільтр кароткага прапускання з даўжынёй хвалі адсечкі 700 нм.Спектр святла паказаны на дадатковым малюнку S4.У якасці альтэрнатывы святло таксама праходзіць праз адзін з 10-нм палосавых фільтраў з цэнтрам на 530, 550, 570, 590, 610, 630, 650, 670 і 690 нм і трапляе на пласціну дыфузара.У выніку на пласціне з нержавеючай сталі насупраць пласціны рассейвальніка ўтварыліся чатыры кропкі выпраменьвання дыяметрам φ50 мкм і рознымі даўжынямі хваль.
Масіў з чатырох капіляраў з чатырма лінзамі ўсталяваны на дзевяцікаляровым спектрометры, як паказана на малюнках 1 і 2. C1 і C2.Чатыры капіляры і чатыры лінзы былі такімі ж, як і ў папярэдніх даследаваннях31,34.Лазерны прамень з даўжынёй хвалі 505 нм і магутнасцю 15 мВт адначасова і раўнамерна апрамяняецца збоку на кропкі выпраменьвання чатырох капіляраў.Флуарэсцэнцыя, выпраменьваная кожнай кропкай выпраменьвання, калімуецца адпаведнай лінзай і падзяляецца на дзевяць каляровых патокаў з дапамогай масіва дэкахраматычных люстэркаў.Затым атрыманыя 36 патокаў непасрэдна ўводзілі ў датчык выявы CMOS (C11440–52U, Hamamatsu Photonics K·K.), і іх выявы адначасова запісваліся.
ABI PRISM® BigDye® Primer Cycle Sequencing Ready Reaction Kit (Applied Biosystems), 4 мкл фарбавальніка GeneScan™ 600 LIZ™ змешвалі для кожнага капіляра шляхам змешвання 1 мкл PowerPlex® 6C Matrix Standard (Promega Corporation), 1 мкл стандарту памеру сумесі.v2.0 (Thermo Fisher Scientific) і 14 мкл вады.Матрычны стандарт PowerPlex® 6C складаецца з шасці фрагментаў ДНК, пазначаных шасцю фарбавальнікамі: FL-6C, JOE-6C, TMR-6C, CXR-6C, TOM-6C і WEN у парадку максімальнай даўжыні хвалі.Даўжыня асноў гэтых фрагментаў ДНК не раскрываецца, але вядомая паслядоўнасць даўжыні асноў фрагментаў ДНК, пазначаных WEN, CXR-6C, TMR-6C, JOE-6C, FL-6C і TOM-6C.Сумесь у ABI PRISM® BigDye® Primer Cycle Sequencing Ready Reaction Kit змяшчае фрагмент ДНК, пазначаны фарбавальнікам dR6G.Даўжыня падстаў фрагментаў ДНК таксама не раскрываецца.GeneScan™ 600 LIZ™ Dye Size Standard v2.0 уключае 36 фрагментаў ДНК, пазначаных LIZ.Даўжыня асноў гэтых фрагментаў ДНК роўная 20, 40, 60, 80, 100, 114, 120, 140, 160, 180, 200, 214, 220, 240, 250, 260, 280, 300, 314, 320, 340, 360, 380, 400, 414, 420, 440, 460, 480, 500, 514, 520, 540, 560, 580 і 600 базавых.Узоры дэнатуравалі пры 94°C на працягу 3 хвілін, затым астуджалі на лёдзе на працягу 5 хвілін.Узоры ўводзілі ў кожны капіляр пры 26 В/см на працягу 9 с і раздзялялі ў кожным капіляры, напоўненым растворам палімера POP-7™ (Thermo Fisher Scientific) з эфектыўнай даўжынёй 36 см і напругай 181 В/см і кут 60°.АД.
Усе дадзеныя, атрыманыя або прааналізаваныя ў ходзе гэтага даследавання, уключаны ў гэты апублікаваны артыкул і дадатковую інфармацыю.Іншыя даныя, якія маюць дачыненне да гэтага даследавання, можна атрымаць у адпаведных аўтараў па абгрунтаваным запыце.
Khan, MJ, Khan, HS, Yousaf, A., Khurshid, K., і Abbas, A. Сучасныя тэндэнцыі ў гіперспектральным аналізе малюнкаў: агляд.Доступ да IEEE 6, 14118–14129.https://doi.org/10.1109/ACCESS.2018.2812999 (2018).
Vaughan, AH Астранамічная інтэрфераметрычная спектраскапія Фабры-Перо.ўсталяваць.Вялебны Астрон.астрафізіка.5, 139-167.https://doi.org/10.1146/annurev.aa.05.090167.001035 (1967).
Goetz, AFH, Wein, G., Саламон, JE і Рок, BN Спектраскапія Зямлі дыстанцыйнага зандзіравання малюнкаў.Навука 228, 1147–1153.https://doi.org/10.1126/science.228.4704.1147 (1985).
Yokoya, N., Grohnfeldt, C., and Chanussot, J. Fusion of hyperspectral and multispectral data: параўнальны агляд апошніх публікацый.IEEE Навукі аб Зямлі.Часопіс дыстанцыйнага зандзіравання.5:29–56.https://doi.org/10.1109/MGRS.2016.2637824 (2017).
Гоўэн, А.А., О'Донэл, С.П., Каллен, П.Дж., Даўні, Г. і Фрыас, Дж.М. Гіперспектральнае адлюстраванне - гэта новы аналітычны інструмент для кантролю якасці і бяспекі харчовых прадуктаў.Тэндэнцыі харчовай навукі.тэхналогіі.18, 590-598.https://doi.org/10.1016/j.tifs.2007.06.001 (2007).
ElMasri, G., Mandour, N., Al-Rejaye, S., Belin, E. і Rousseau, D. Апошнія прымянення мультыспектральнай візуалізацыі для маніторынгу фенатыпу і якасці насення - агляд.Датчыкі 19, 1090 (2019).
Лян, Х. Дасягненні ў мультыспектральнай і гіперспектральнай візуалізацыі для археалогіі і захавання мастацтва.Падаць заяўку на фізічны 106, 309–323.https://doi.org/10.1007/s00339-011-6689-1 (2012).
Эдэльман Дж.Дж., Гастан Э., ван Левэн Т.Г., Каллен П.Дж. і Альдэрс М.К.Г. Гіперспектральная візуалізацыя для бескантактавага аналізу крыміналістычных слядоў.Крыміналістыка.унутраная 223, 28-39.https://doi.org/10.1016/j.forsciint.2012.09.012 (2012).
Час публікацыі: 10 студзеня 2023 г